用于宏基因组测序分析的人类粪便样品取样方法

一、样本筛选

1.如果受试者存在以下情况，则需剔除：

（1）5年内有过胃肠道大手术的（胆囊切除术和阑尾切除术）；

（2）有过主要肠道切除手术；

（3）炎症性肠病（IBD），包括溃疡性结肠炎、克罗恩病（Crohn’s disease）或不确定的结肠炎；

（4）肠易激综合症（IBS）；

（5）持久性、传染性胃肠炎、结肠炎或胃炎;持续或慢性腹泻的病因不明，艰难梭状芽胞杆菌感染（复发）或幽门螺杆菌感染（未治疗）；

（6）慢性便秘；

（7）历史性的胃或肠道溃疡、胃肠道出血、腹痛、消化不良、胃肠里急后重（下坠）或排便困难，胃肠道或结肠息肉或包块或发育不良或癌症，以及腹泻或传染性胃肠炎；

（8）药物治疗记录：含碱式水杨酸铋， Pepto-Bismol， Kaopectate， Maalox Total Relief， Bismatrol， Pink Bismuth， Stomach Relief， Stress， Walgreens Soothe 和其它类似的铋碱式水杨酸盐的药物成分的药物。

2.对于存在历史性胃肠道疾病患者执行简单临床检查：腹部压痛、疼痛及肛门疾病。

二、准备材料

微生太^®粪便采集包一套：内含无菌粪便采集管三个，mark笔一支，一次性手套一双，自封袋一个；冰或冰袋或干冰，冰盒一个。

三、收集方法

1.自然排便法

（1）拆开微生太®粪便采集包，在采集管管壁和管盖以及自封袋上都写上样品名称（样品名称只能用英文字母或阿拉伯数字或两者的组合，而且字符数大于3小于9）；

（2）排便前先排尽尿液，以免尿液污染；将马桶冲洗干净，排便在无水处，然后用取样勺挖取没有接触空气的粪便2g（1-2小勺），拧紧盖子，重复取3管，保存于自封袋；

（3）将自封袋放入冰盒，用冰或冰袋或干冰填埋，以制造低温环境，阻止菌群生长，2小时内保存到-80℃冰箱（如果是干冰填埋，只要在干冰挥发完之前送达即可）；

（4）所有样品收集完毕后，将每人三管中的一管粪便寄送到北京微生太科技有限公司实验室，进行宏基因组测序分析或菌群结构谱测序分析，寄送时需要干冰冷冻。

2.直肠拭子法

不易获得粪便时，可采用直肠拭子法采集。肥皂、水和 70%的酒精清洁肛门周围，将无菌拭子用生理盐水湿润后插入肛门 4～5cm(幼儿 2～3cm)，在肛门括约肌处轻柔的旋转，于肛门隐窝处取样，可在拭子上明显见到粪便，然后保存在无菌采样管。其他步骤参考“自然排便法”。

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